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色譜柱的再生和維護規程

點擊: 次 時間:2016-11-18 09:36

 一、色譜柱的再生
    色譜柱的再生因為色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,會出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰的現象,一般來說可能是柱效下降。
(1)反相柱的再生:
    依次采用20~30倍的色譜柱體積的甲醇:水=10:90(V/V),乙腈,異丙醇作為流動相沖洗色譜柱,完成后再以相反順序沖洗色譜柱。
(2)正相柱的再生:
    依次以20~30倍色譜柱的體積的正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作為流動相沖洗色譜柱,然后再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意上述溶劑必須嚴格脫水。
進行色譜柱再生時,應使用一個謙價的泵,我們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
注意:在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此,應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質,用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
二、色譜柱的維護
1.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度);
2.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2~7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍;
3.避免流動相組成及極性的劇烈變化;
4.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理;
5.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存大乙腈中;
6.壓力升高是需要更換預柱的信號。
 
 



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