本文主要介紹液相色譜柱的相關(guān)參數(shù)，具體如下。

1、表面積

顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/gram表示。

高表面積對(duì)于多組份樣品的分離具有較強(qiáng)的保留能力，柱容量和分離度。表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡狀態(tài)，對(duì)于梯度淋洗尤為重要。

2、孔徑

顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍60-10,000Å。

大孔的填料顆粒可以延長(zhǎng)溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時(shí)間，達(dá)到充分分離，改善峰形；樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑，樣品MW＞4000選擇300Å的孔徑

3、碳覆蓋率

對(duì)色譜分離的影響，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。

高碳覆蓋率可以提高分辨率，分析時(shí)間長(zhǎng)。低碳覆蓋率縮短運(yùn)行時(shí)間。

4、封端/封尾

封端對(duì)色譜分離的影響，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基（二次鍵合）

封端就是減輕待測(cè)組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象，對(duì)于極性樣品，未封端與經(jīng)過(guò)封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異。

5、粒徑

1.8um~3.5um便于快速分離，5um是行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，7um是制備柱。

引申閱讀：如何沖洗液相色譜柱

1、對(duì)于反相色譜柱的沖洗

用以下溶劑至少各25mL沖洗色譜柱(分析柱)：不含緩沖鹽的流動(dòng)相、100%甲醇、100%乙腈、75%乙腈+25%異丙醇、100%異丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。

注意若使用己烷或二氯甲烷沖洗色譜柱，則在重新使用反相流動(dòng)相以前，必須用異丙醇沖洗色譜柱。

2、對(duì)于正相色譜柱的沖洗

用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱(分析柱)：50%甲醇+50%三氯甲烷、100%乙酸乙酯。