一、瓊脂培養基的融化

將培養基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高壓鍋中的層流蒸汽）使之融化。經過高壓的培養基應盡量減少重新加熱時間，融化后避免過度加熱。融化后應短暫置于室溫中（如2 min）以避免玻璃瓶破碎。

融化后的培養基放入47℃～50℃的恒溫水浴鍋中冷卻保溫(可根據實際培養基凝固溫度適當提高水浴鍋溫度)，直至使用，培養基達到47℃～50℃的時間與培養基的品種、體積、數量有關。融化后的培養基應盡快使用，放置時間一般不應超過4 h。未用完的培養基不能重新凝固留待下次使用。敏感的培養基尤應注意，融化后保溫時間應盡量縮短，如有特定要求可參考指定的標準。

傾注到樣品中的培養基溫度應控制在約45℃左右。

二、平板的制備和儲存

傾注融化的培養基到平皿中，使之在平皿中形成厚度至少為3 mm（直徑90 mm的平皿，通常要加入18 mL～20 mL瓊脂培養基）。將平皿蓋好皿蓋后放到水平平面使瓊脂冷卻凝固。如果平板需儲存，或者培養時間超過48 h或培養溫度高于40 ℃，則需要傾注更多的培養基。凝固后的培養基應立即使用或存放于暗處和（或）5℃±3℃冰箱的密封袋中，以防止培養基成分的改變。在平板底部或側邊做好標記，標記的內容包括名稱、制備日期和（或）有效期。也可使用適宜的培養基編碼系統進行標記。

將倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延長儲存期限。為了避免冷凝水的產生，平板應冷卻后再裝入袋中。儲存前不要對培養基表面進行干燥處理。

對于采用表面接種形式培養的固體培養基，應先對瓊脂表面進行干燥：揭開平皿蓋，將平板倒扣于烘箱或培養箱中（溫度設為25℃～50℃）；或放在有對流的無菌凈化臺中，直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。

商品化的平板瓊脂培養基應按照廠商提供的說明使用。

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