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各種常見緩沖液的配制方法

點(diǎn)擊: 次 時(shí)間:2019-06-13 12:01


    磷酸鹽緩沖液,Tris緩沖液和檸檬酸緩沖液等是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液。然而,這些緩沖液的配制比較麻煩,尤其當(dāng)要獲得特定pH值的緩沖液時(shí),調(diào)節(jié)pH值是費(fèi)力、費(fèi)時(shí)的事情。對(duì)于Tris等緩沖液等,pH計(jì)是無法準(zhǔn)確測(cè)量其pH值的。
    那么,有沒有簡(jiǎn)便的方法來配制特定濃度和pH值的上述緩沖液呢?
1)配制磷酸鹽緩沖液:由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2)配制檸檬酸(鹽)緩沖液:由Citric Acid(檸檬酸)和Trisodium Citrate(檸檬酸鈉)混合而得。
3)配制醋酸溶液:在水中加入一定體積的醋酸而得。
4)配制Tris緩沖液:由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris堿)混合而得。
5)重量與摩爾數(shù)轉(zhuǎn)換工具:已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩爾數(shù)和分子數(shù),以及在一定體積內(nèi)摩爾濃度。相反,也可由一個(gè)蛋白的摩爾數(shù)推算出重量和分子數(shù),以及由摩爾濃度推算出所含的蛋白質(zhì)量。
 

    附:這些緩沖液在溶解重組細(xì)胞因子和蛋白中的應(yīng)用舉例:
1)磷酸鹽緩沖液:1xPBS用于溶解100-19Human KGF 和100-52Human FGF-23等。
2)檸檬酸(鹽)緩沖液:5mM檸檬酸鈉(pH8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM檸檬酸(pH3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3)醋酸溶液:10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4)Tris緩沖液:5mM Tris(pH7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。



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