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熒光分光光度計的熒光分光光度法試驗

點擊: 次 時間:2019-12-04 17:12


    熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。可用于液體、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。

    所用的儀器為熒光計或熒光分光光度計,按各品種項下的規定,選定激發光波長和發射光波長,并制備對照品溶液和供試品溶液。

    通常熒光分光光度法是在一定條件下,測定對照品溶液熒光強度與其濃度的線性關系。當線性關系良好時,可在每次測定前,用一定濃度的對照品溶液校正儀器的靈敏度;然后在相同的條件下,分別讀取對照品溶液及其試劑空白的熒光強度與供試品溶液及其試劑空白的熒光強度,計算供試品濃度。

    當濃度與熒光強度明顯偏離線性時,應改用標準曲線法進行含量測定。

    對易被光分解或弛豫時間較長的品種,為使儀器靈敏度定標準確,避免因激發光多次照射而影響熒光強度,可選擇一種激發光和發射光波長與供試品近似而對光穩定的物質配成適當濃度的溶液,作為基準溶液。在測定供試品溶液時選擇適當的基準溶液代替對照品溶液校正儀器的靈敏度。

 熒光分光光度計應用

    對經光源激發后產生熒光的物質或經化學處理后產生熒光的物質成份分析,可應用于生物化學、生物醫學、環境化工等部門。

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