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吸光光度法和熒光分析法有什么區別

點擊: 次 時間:2017-08-15 11:13

    紫外-可見吸收光譜法是根據溶液中物質的分子或離子對紫外和可見光譜區輻射能的吸收來研究物質的組成和結構的方法,而熒光分析法是由于處于第一激發單重態最低能級的分子以輻射躍遷的形成返回基態各振動能級時產生的熒光的分析方法,兩者的區別在于前者研究的是吸收光譜,且電子躍遷為激發態的振動能級到基態的振動能級間的躍遷。
    熒光分析法的靈敏度高,其檢出限通常比分光光度法低2~4個數量級,選擇性也比分光光度法好,這是由于:
a 熒光分析儀器在與激發光相垂直的方向測量熒光,與分光光度在一直線上測量相比,消除了透射光的影響,測量更為準確,靈敏度高;
b 吸光光度法只采用一個單色器,而熒光分析儀器有兩個單色器,分別用于獲得單色性較好的激發光和分出某一波長的熒光,消除其它雜散光的干擾,其儀器的準確度、靈敏度也更高;
c 熒光測量中的激發光源比吸收光度法的光源有更大的發射強度,光源更穩定,因此其儀器的準確度、靈敏度也就更高。
    綜上所述,熒光分光光度計熒光法的檢出限優于吸光光度法。
(內容來源上分官網)
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